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麹菌（Aspergillus oryzae）は数百年にわたり日本酒、しょうゆ、みそなどの醗酵食品の製造に利用されてきたことから、その高い安全性が認められています。また、高いタンパク質生産能を持つことから、タンパク質生産の宿主として注目されています。大関㈱総合研究所では長年にわたる当社独自の技術開発の結果、麹菌によるタンパク質生産システムの構築に成功しタンパク質の受託発現サービスを提供しています。

高発現プロモーター

アミラーゼ系遺伝子の発現制御に関与するシス・エレメント（RegionIII）を利用した改良プロモーターを用いることにより、高い転写効率が達成されています。

効果的ターミネーター

効果的なターミネーターとして独自に単離したDNA配列を用いています。

高い翻訳効率

私たちは麹菌において、翻訳効率が5’UTR依存的に大きく変化することを初めて確認し、効果的な5’UTR配列を用いることで高い翻訳効率を実現しました。

高純度分泌生産

本発現システムの特性により、宿主由来のアミラーゼ系酵素の発現を著しく低下させることが可能であるため、培地中の夾雑タンパク質量は極めて少なく、目的のタンパク質を高純度生産することが可能です。

糖鎖が付加されます。

麹菌に導入された発現カセットは染色体上に組み込まれるため、安定に保持されます。

導入発現カセット数については、1組のみ（1コピー）の場合と、
複数導入（多コピー）の場合があり、多コピーの場合にはより高い生産量が期待できます。

Aspergillus oryzae の栄養要求性株を宿主とし、1コピー導入株、多コピー導入株、さらに異なる遺伝子の2重導入株の育種等が可能です。

発現ベクター構築

高発現ベクターに目的遺伝子を挿入し、形質転換用ベクターを構築後、シークエンスを確認します。

形質転換体の取得、純化

麹菌を形質転換し、1コピー株を取得します。

発現の確認

取得した形質転換体を用いて発現の確認を行います。

提供物の調製

形質転換体を培養し、集菌後、培養上清、又は菌体抽出液をご提供します。

納期

３ヶ月～

コドンの改変

麹菌のコドン使用頻度に合わせて遺伝子をデザインし全合成します。

分泌シグナル等の付加

麹菌由来の分泌シグナルやキャリアータンパク質を利用した設計も可能です。

スケールアップ培養

Jarを用いて形質転換体を培養し、培養上清を提供します。

スクリーニング規模の拡大（多コピー株の取得）

コピー数は保証できかねます。低コピー株しか得られない場合があります。

形質転換体の提供

研究目的に限り、別途契約の上、形質転換体をご提供いたします。
商用利用目的については、別途ご相談させていただきます。

ご注文内容に関する秘密は厳守いたします。
必要に応じ秘密保持契約を締結させて頂きます。
価格、納期はその都度、お見積りいたします。
詳細はお問合せください。

• すべてのサービスは発現・活性を保証するものではありません。
• 商用利用については別途契約の必要が御座います。
• ライセンスの詳しい内容についてはお問合せください。

■参考文献

• Aspergillus属の異種遺伝子発現系
  峰時俊貴，化学と生物，38，831-838 (2000).
• 麹菌によるタンパク質大量生産システムの開発
  幸田明生，峰時俊貴，生物工学，83，295-297 (2005).
• 転写後過程の改良による異種タンパク質生産の効率化　
  幸田明生，徳岡昌文，五味勝也，バイオサイエンスと
  インダストリー，63，543-546 (2005).
• シス・エレメント導入によるAspergillus oryzae
  エノラーゼプロモーターの改良
  Tsuboi, H. et al., Biosci. Biotechnol. Biochem.,
  69, 206-208 (2005)