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西斯(酵母细胞壁溶解酶)

它能溶解酵母细胞壁,从而制备各种DNA和细胞内酶。
可以制备酵母原生质体。

制品名 销售目的地 销售代码编号 可容纳人数
西斯 Takara Bio Inc. 9005 1克
特长 这是一种用于裂解酵母细胞壁的复杂酶制剂,主要由β-1,6葡聚糖酶和β-1,3葡聚糖酶活性组成。
特别是,它的主要活性是β-1,6葡聚糖酶,这使其与其他用于裂解酵母细胞壁的酶制剂有所区别。
本产品不仅对子囊菌酵母有效,而且对担子菌酵母和不完全酵母也有效,能够制备原生质体并实现较高的原生质体再生率。由于在推荐条件下未观察到DNase活性,因此也可用于从酵母中提取DNA。
形状 冻干粉(含硅藻土作为赋形剂)
保存 4℃,干燥条件
原产地 罗氏链霉菌 DB-34
规格 β-1,6葡聚糖酶活性(37℃)≥400 U/g粉末
细胞壁溶解活性(30℃)≥35,000 U/g 粉末
最佳温度 30 50〜℃
最佳pH值 6.0
使用方法 将适量样品溶解于麦克尔文缓冲液(0.1 M 柠檬酸溶液和 0​​.2 M 磷酸氢二钠溶液,体积比约为 36.8:63.2,pH 值调至 6.0)中,使用前经醋酸纤维素滤膜过滤。制备原生质体时,必须使用酒石酸钠二水合物作为渗透压调节剂。目标酵母必须处于对数生长期。

应用

各种酵母的原生质体形成

拉紧 原生质体形成率(%)
西斯 溶壁酶
粟酒裂殖酵母 IFO 0351
酿酒酵母e X2180-1A
柔氏接合酵母 IFO 1130 ×
汉逊酵母 RIB 522
乳酸克鲁维酵母s IFO 0433
异常毕赤酵母 IFO 10213
斯达氏油脂酵母 IFO 10381
花状丝状杆菌 IFO 1915 ×
玉米黑粉菌 IFO 5346 ×
圆红孢子虫 IFO 10512 ×
银耳 IFO 9310 ×
楠楠 IFO 9100 ×
玫瑰孢子丝菌 IFO 1105 × ×
酒香酵母 IFO 0797
念珠菌 IFO 0663
热带假丝酵母 IFO 1400
念珠菌 IFO 0639
克勒克树 IFO 0865
粘红酵母 IFO 1125 × ×
Trigonopsis variabilis IFO 0755
白色隐球菌 IFO 0612 ×
红酵母 IFO 10129

原生质体形成率:○:80% 或以上,△:50% 或以上,×:0%

文学

  • Yoshida, M.、Nishi, A.、Obuchi, K.、Hojo, T.、Matsuzawa, A.、Hamaji, M. 和 Kumagai, C. (1997)。
    生物技术,75,229。
  • Nishi, A.、Obuchi, K.、Hamaji, M. 和 Kumagai, C. (1999)。
    生物技术,77,60。
  • Obuchi, K.、Nishi, A.、Hamaji, M. 和 Kumagai, C. (1999)。
    生物技术,77,137。

常见问题

使用时需要过滤吗?
作为赋形剂所含的硅藻土不溶于水,因此如果不进行过滤,就会形成沉淀,产品将难以处理。
请务必过滤水。硅藻土也可以起到过滤助剂的作用。
缓冲区必须是 McIlvaine 缓冲区吗?
不一定非得是麦克尔文牌的抛光机。根据你的用途,试试其他易于使用的抛光机。
当我使用山梨醇作为渗透压调节剂时,我无法制备原生质体。这是为什么?
除非使用有机酸盐作为渗透压调节剂,否则这种酶无法发挥其全部作用。
务必使用有机酸盐,最好是酒石酸钠。在再生用于转化的原生质体时,使用山梨醇作为渗透剂。
合适的酶浓度是多少?
反应过程中 0.5% 的浓度预计就足够了,但根据应用情况,较低的浓度可能更合适。